紫外分光光度法有什么用
v1800可见分光光度计使用方法?
v1800可见分光光度计使用方法?
uv1800紫外分光光度计正确操作流程:
一、开机预热
1、打开仪器样品室盖板,拿出其中用于干燥的硅胶袋。确保样品室光路无物体阻挡。再关上样品室盖板。
2、打开仪器右侧下部电源开关,仪器即进入自检程序。自检过程中不得打开样品室盖板。
3、自检结束,再按仪器面板上的“F4”键,仪器即可切换至由电脑控制。
4、启动电脑,点击软件UV Probe, 出现对话框后,点击下部的“Connect”按钮。
二、样品准备
1、样品以适当的溶剂溶解。注意:不能用氯仿!因其可导致比色皿散架!二氯甲烷亦应慎用。常用溶剂为水及醇类。
2、测样前确认比色皿是玻璃的还是石英的?因玻璃在紫外区有吸收,作紫外光谱扫描要用石英比色皿,一般其上部标上“S”或“Q”的标志。
三、样品测定
1、在软件界面选择windows按钮,下拉,选择Spectrum按钮,点击,即出现光谱测量界面。
2、将样品的溶剂分别倒入两个比色皿中,加至比色皿约2/3的高度,再盖上方形比色皿顶盖(以免溶剂挥发而影响测定结果)。手持比色皿粗糙面(毛面),用擦镜纸轻轻擦净比色皿光面。
3、将两个比色皿放入样品室的比色皿架中。其中一个为参比架,一个为样品架(默认为靠外侧的比色皿架)。
4、在Spectrum界面单击Baseline,选定波长为800~200 nm, 启动基线校正操作。
5、Baseline操作结束,选择"Go To WL",在对话框中输入500 (nm)。点击确定。
6、再点击“Autozero”,以消除两个比色皿之间的误差。
7、拿出样品架的比色皿,加入待测样品至2/3高度。
8、点击“Start”。仪器即开始扫描光谱。
9、扫描结束,右侧窗口即可出现光谱图。一般要保持吸光度在0.1~1.0之间较为合适。如果样品太浓,稀释后再重新测定。调整横轴和纵轴到合适的范围。点击光谱图可查看相关的参数,如:吸收峰等。
10、点击“File”---“Save as”可保存当前的文件。
此处只介绍紫外光谱的测定方法。其它测量(如:光度定量测量、动力学等)详见说明书。
四、关机
1、测量完毕,将比色皿从样品池中取出。
2、 点击软件下部的按钮“Disconnect”,退出软件窗口。
3、关闭仪器右下侧的电源开关。
紫外分光光度法为何有时用1CM, 有时用5CM比色皿?
这和你的溶液的浓度有关。
紫外分光光度计是根据接受到的钠黄灯的强度来显示溶液的相对浓度的。如果你的溶液浓度太大。而你又采用了5CM比色皿。那么接收器将有可能不会接受到钠黄灯发出来的光。所以仪器分析出来的结论是你放入了一个不透光的物质。这时你就需要采用1CM比色皿。透光率还是0。那你必需要采用更薄一些的比色皿。或者稀释一下溶液的浓度。
相反,如果溶液浓度太低紫外分光光度计的透光率是100那你就需要换厚一点的比色皿或者浓缩一下溶液。
这里的浓缩和稀释都是要按照一定比例的。这样才能最后计算出溶液浓度。